1.Ano ang cell culture?
Ang kultura ng cell ay tumutukoy sa pag-alis ng mga selula mula sa mga hayop o halaman at pagkatapos ay lumalaki ang mga ito sa isang kanais-nais na artipisyal na kapaligiran.Ang mga selula ay maaaring kunin nang direkta mula sa tisyu at pinaghiwa-hiwalay sa pamamagitan ng enzymatic o mekanikal na paraan bago i-culture, o maaari silang makuha mula sa mga itinatag na linya ng cell o mga linya ng cell.
2.Ano ang pangunahing kultura?
Ang pangunahing kultura ay tumutukoy sa yugto ng kultura pagkatapos na ihiwalay ang mga selula mula sa tisyu at dumami sa ilalim ng naaangkop na mga kondisyon hanggang sa masakop nila ang lahat ng magagamit na mga substrate (iyon ay, maabot ang confluence).Sa yugtong ito, ang mga cell ay dapat na subcultured sa pamamagitan ng paglilipat ng mga ito sa isang bagong lalagyan na may sariwang medium ng paglago upang magbigay ng mas maraming espasyo para sa patuloy na paglaki.
2.1 Cell line
Pagkatapos ng unang subculture, ang pangunahing kultura ay tinatawag na cell line o subclone.Ang mga linya ng cell na nagmula sa mga pangunahing kultura ay may limitadong habang-buhay (ibig sabihin, ang mga ito ay limitado; tingnan sa ibaba), at sa pagdaan nila, ang mga cell na may pinakamataas na kapasidad ng paglaki ay nangingibabaw, na nagreresulta sa isang tiyak na antas ng genotype sa populasyon na nagpapatuloy sa phenotype.
2.2 Cell strain
Kung ang isang subpopulasyon ng isang cell line ay positibong pinili mula sa kultura sa pamamagitan ng pag-clone o iba pang paraan, ang cell line ay magiging isang cell strain.Ang mga cell strain ay karaniwang nakakakuha ng karagdagang mga pagbabago sa genetic pagkatapos magsimula ang linya ng magulang.
3. Limitado at tuluy-tuloy na mga linya ng cell
Ang mga normal na selula ay kadalasang nahahati lamang sa isang limitadong bilang ng beses bago mawala ang kakayahang dumami.Ito ay isang genetically determined event na tinatawag na senescence;ang mga linya ng cell na ito ay tinatawag na may hangganan na mga linya ng cell.Gayunpaman, ang ilang mga linya ng cell ay nagiging imortal sa pamamagitan ng isang proseso na tinatawag na pagbabagong-anyo, na maaaring mangyari nang kusang-loob o maaaring maimpluwensyahan ng mga kemikal o virus.Kapag ang isang may hangganang linya ng cell ay sumasailalim sa pagbabagong-anyo at nakakuha ng kakayahang hatiin nang walang katapusan, ito ay nagiging isang tuloy-tuloy na linya ng cell.
4.Kalagayan ng kultura
Ang mga kondisyon ng kultura ng bawat uri ng cell ay ibang-iba, ngunit ang artipisyal na kapaligiran para sa pag-culture ng mga cell ay palaging binubuo ng angkop na lalagyan, na naglalaman ng mga sumusunod:
4.1 Substrate o culture medium na nagbibigay ng mahahalagang sustansya (amino acids, carbohydrates, bitamina, mineral)
4.2 Mga salik ng paglago
4.3 Mga Hormone
4.4 Mga Gas (O2, CO2)
4.5 Reguladong pisikal at kemikal na kapaligiran (pH, osmotic pressure, temperatura)
Karamihan sa mga cell ay nakadepende sa anchorage at dapat i-culture sa isang solid o semi-solid na substrate (adherent o monolayer culture), habang ang ibang mga cell ay maaaring lumaki nang lumulutang sa medium (suspension culture).
5.Cryopreservation
Kung mayroong labis na mga cell sa subculture, dapat silang tratuhin ng naaangkop na ahente ng proteksyon (tulad ng DMSO o glycerol) at iimbak sa isang temperatura sa ibaba -130°C (cryopreservation) hanggang sa kailanganin ang mga ito.Para sa karagdagang impormasyon tungkol sa subculture at cryopreservation ng mga cell.
6.Morpolohiya ng mga selula sa kultura
Ang mga cell sa kultura ay maaaring hatiin sa tatlong pangunahing kategorya batay sa kanilang hugis at hitsura (ibig sabihin, morpolohiya).
6.1 Ang mga selula ng Fibroblast ay bipolar o multipolar, may pinahabang hugis, at lumalaking nakakabit sa substrate.
6.2 Ang mga cell na tulad ng epithelial ay polygonal, may mas regular na laki, at nakakabit sa matrix sa mga discrete sheet.
6.3 Ang mga selulang tulad ng lymphoblast ay spherical at karaniwang lumalaki sa suspensyon nang hindi nakakabit sa ibabaw.
7.Application ng cell culture
Ang kultura ng cell ay isa sa mga pangunahing tool na ginagamit sa cell at molecular biology.Nagbibigay ito ng mahusay na sistema ng modelo para sa pag-aaral ng normal na pisyolohiya at biochemistry ng mga cell (tulad ng metabolic research, pagtanda), ang mga epekto ng mga gamot at nakakalason na compound sa mga cell, at mutagenesis at mga carcinogenic effect.Ginagamit din ito para sa pagsusuri at pagpapaunlad ng gamot at malakihang paggawa ng mga biological compound (tulad ng mga bakuna, mga therapeutic protein).Ang pangunahing bentahe ng paggamit ng cell culture para sa alinman sa mga application na ito ay ang pagkakapare-pareho at reproducibility ng mga resulta na maaaring makuha gamit ang isang batch ng mga cloned cell.
Oras ng post: Hun-03-2019