1.Pagpili ng tamang linya ng cell
Kapag pumipili ng naaangkop na linya ng cell para sa iyong eksperimento, mangyaring isaalang-alang ang sumusunod na pamantayan:
a.Species: Ang mga linya ng cell na hindi tao at hindi primate ay karaniwang may mas kaunting mga paghihigpit sa biosafety, ngunit sa huli ay matutukoy ng iyong eksperimento kung gagamit ng kultura ng isang partikular na species.
b.Mga Tampok: Ano ang layunin ng iyong eksperimento?Halimbawa, ang mga linya ng cell na nagmula sa atay at bato ay maaaring mas angkop para sa pagsusuri sa toxicity.
c. Limitado o tuloy-tuloy: Bagama't ang pagpili mula sa isang limitadong linya ng cell ay maaaring magbigay sa iyo ng higit pang mga opsyon para sa pagpapahayag ng tamang function, ang tuluy-tuloy na mga linya ng cell ay karaniwang mas madaling i-clone at mapanatili.
d.Normal o transformed: Ang mga transformed cell line ay kadalasang may mas mataas na rate ng paglago at mas mataas na seeding efficiency, tuluy-tuloy, at nangangailangan ng mas kaunting serum sa culture medium, ngunit ang kanilang phenotype ay dumaan sa mga permanenteng pagbabago sa pamamagitan ng genetic transformation.
e. Mga kondisyon at katangian ng paglago: Ano ang iyong mga kinakailangan para sa bilis ng paglago, densidad ng saturation, kahusayan sa pag-clone at kakayahan sa paglago ng suspensyon?Halimbawa, upang maipahayag ang mga recombinant na protina sa mataas na ani, maaaring kailanganin mong pumili ng mga linya ng cell na may mabilis na mga rate ng paglago at kakayahang lumaki sa pagsususpinde.
f. Iba pang pamantayan: Kung gumagamit ka ng limitadong linya ng cell, mayroon bang sapat na stock na magagamit?Ang cell line ba ay ganap na nailalarawan, o kailangan mo ba itong i-verify mismo?Kung gumagamit ka ng abnormal na linya ng cell, mayroon bang katumbas na normal na linya ng cell na maaaring gamitin bilang kontrol?Stable ba ang cell line?Kung hindi, gaano kadali itong i-clone at bumuo ng sapat na frozen na stock para sa iyong eksperimento?
2. Kumuha ng mga linya ng cell
Maaari kang bumuo ng iyong sariling kultura mula sa mga pangunahing cell, o maaari mong piliing bumili ng mga naitatag na kultura ng cell mula sa mga komersyal o non-profit na supplier (ibig sabihin, mga cell bank).Ang mga kagalang-galang na supplier ay nagbibigay ng mataas na kalidad na mga linya ng cell na maingat na nasubok para sa integridad at tinitiyak na ang kultura ay walang mga kontaminant.Inirerekomenda namin na huwag humiram ng mga kultura mula sa ibang mga laboratoryo dahil mataas ang panganib ng mga ito sa kontaminasyon ng cell culture.Anuman ang pinagmulan nito, pakitiyak na ang lahat ng mga bagong linya ng cell ay nasubok para sa kontaminasyon ng mycoplasma bago mo simulan ang paggamit nito.
Oras ng post: Peb-01-2023